膠原蛋白檢測(cè)方案

背景簡(jiǎn)介：

膠原是細(xì)胞外基質(zhì)的重要組分之一，占蛋白含量的25%-30%，是組成動(dòng)物皮膚、骨骼、肌腱、血管等結(jié)締組織的重要成分。檢測(cè)膠原蛋白含量可以幫助評(píng)估某些疾病的進(jìn)展或治療效果，膠原水平的過(guò)高或過(guò)低都會(huì)導(dǎo)致疾病。例如：膠原過(guò)多會(huì)導(dǎo)致組織纖維化，膠原過(guò)少會(huì)導(dǎo)致骨關(guān)節(jié)炎。因此在許多疾病研究中測(cè)定膠原水平非常重要。

膠原蛋白常用檢測(cè)方法：

1）  羥脯氨酸比色法

膠原蛋白有其有的氨基酸，羥脯氨酸。羥脯氨酸是一類(lèi)非蛋白氨基酸，存在于哺乳動(dòng)物的彈性蛋白和膠原中。這種氨基酸限于膠原的三螺旋結(jié)構(gòu)中，它的存在增加了三螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。羥脯氨酸在組織中水解被用作分析膠原含量的直接指標(biāo)。羥脯氨酸含量，即：包括了所有類(lèi)型的膠原及膠原前體、成熟的膠原、降解的膠原，在570nm處檢測(cè)吸光度即可，通過(guò)換算關(guān)系得到總膠原蛋白含量。

2）天狼星紅的可溶性膠原蛋白測(cè)定

天狼星紅是一種染料，它與纖維性膠原（I型至V型）上的[Gly-X-Y]n螺旋結(jié)構(gòu)特異性結(jié)合，不區(qū)分膠原蛋白種類(lèi)和膠原類(lèi)型，因此通過(guò)測(cè)量其吸光度來(lái)定量膠原蛋白。

3) 基于天狼星紅的組織切片染色

天狼猩紅是一種染料，它與纖維性膠原（I型至V型）上的[Gly-X-Y]n螺旋結(jié)構(gòu)特異性結(jié)合，不區(qū)分膠原蛋白種類(lèi)和膠原類(lèi)型，而固綠（Fast Green）與非膠原蛋白結(jié)合。由于天狼星紅和固綠分別在540 nm和605 nm處具有吸收，因此提取染料的OD值可用于計(jì)算樣本的膠原蛋白和非膠原蛋白含量。

北京博蕾德生物科技有限公司提供Quiczyme 總膠原蛋白檢測(cè)試劑盒（羥脯氨酸原理）用于定量檢測(cè)組織、細(xì)胞樣本中的總膠原蛋白含量。

檢測(cè)原理：

QuickZyme 的總膠原檢測(cè)試劑盒是基于羥脯氨酸的檢測(cè)。羥脯氨酸是一類(lèi)非蛋白氨基酸，存在于哺乳動(dòng)物的彈性蛋白和膠原中。這種氨基酸限于家園的三螺旋結(jié)構(gòu)中，它的存在增加了三螺旋結(jié)構(gòu)的穩(wěn)定性。羥脯氨酸在組織中水解被用作分析膠原含量的直接指標(biāo)。試劑盒檢測(cè)樣本中總的羥脯氨酸含量，即：包括了所有類(lèi)型的膠原及膠原前體、成熟的膠原、降解的膠原，在570nm處檢測(cè)吸光度即可。試劑盒和操作簡(jiǎn)單，不需做水解后的干燥步驟（需要特殊設(shè)備）。

產(chǎn)品優(yōu)勢(shì)：

l  用于檢測(cè)所有類(lèi)型的的膠原。

l  不受種屬限制

l  方便、快捷

l  線性范圍廣

l  基于羥脯氨酸的分析檢測(cè)

l  不受提取方法限制

l  不需特殊的檢測(cè)設(shè)備

產(chǎn)品特點(diǎn)：

檢測(cè)范圍：6-300ug/ml

靈敏度：2.5ug/ml

樣本量：50-500ul

檢測(cè)樣本：細(xì)胞提取物、組織提取物、不受種屬限制、不受膠原類(lèi)型限制。

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